PCR實(shí)驗(yàn)室建設(shè)四要素

　　1、試劑制備區(qū)

　　用于制備檢測(cè)試劑，該區(qū)域處于正壓狀態(tài)，目的是避免污染物外溢。 該區(qū)域內(nèi)部可分為三個(gè)區(qū)域：普通提取試劑制備區(qū)、PCR試劑制備區(qū)和PCR主反應(yīng)液制備區(qū)，在常用提取試劑制備區(qū)，準(zhǔn)備一些樣品核酸提取所需的裂解液和提取液; PCR試劑制備區(qū)用于PCR試劑的制備和儲(chǔ)存。 例如，準(zhǔn)備引物、探針和其他 PCR 試劑，為避免交叉污染，避免反復(fù)凍融，應(yīng)將試劑儲(chǔ)存液平均到一個(gè)較小的工作體積，儲(chǔ)存在這個(gè)房間內(nèi)以備后用：PCR主反應(yīng)液制備區(qū)將進(jìn)行主反應(yīng)液( 除樣品外。所有 PCR 所需試劑的混合)加入 PCR 管中。 重要提示：請(qǐng)勿將其他房間的材料(包括擴(kuò)增、模板和目標(biāo)核酸或陽(yáng)性對(duì)照、耗材或設(shè)備)帶入試劑制備區(qū)。

　　2、制樣區(qū)

　　該區(qū)無壓力設(shè)置要求，該區(qū)域用于分割樣品、碾磨、壓碎和均質(zhì)樣品。 由于在這些粉碎、碾磨和均質(zhì)過程當(dāng)中會(huì)產(chǎn)生氣溶膠，因此陽(yáng)性樣品可能會(huì)污染后續(xù)操作，該區(qū)域應(yīng)與后方區(qū)域嚴(yán)格分開，并應(yīng)放置在與后方三個(gè)區(qū)域分開的單獨(dú)房間內(nèi)，樣品制備區(qū)還可以設(shè)置專門的封閉區(qū)域或房間，用于樣品接收和儲(chǔ)存。 該房間可以放置在冰箱中用于樣品儲(chǔ)存，并應(yīng)與樣品制備區(qū)的其他區(qū)域分開，樣品制備區(qū)的人員不得進(jìn)入試劑制備區(qū)。

　　3、核酸提取區(qū)域

　　核酸提取區(qū)域是樣品核酸提取區(qū)域，該區(qū)域處于負(fù)壓狀態(tài)，目的是避免核酸外溢造成污染，樣品制備區(qū)還包括從樣品中提取和純化核酸的區(qū)域和向裝有PCR的主反應(yīng)混合物管中加入核酸的操作區(qū)。 添加樣品后，盡快關(guān)閉 PCR 管蓋，使用PCR板和塑料蓋板時(shí)，陽(yáng)性對(duì)照和含有目標(biāo)序列的樣品應(yīng)與待測(cè)樣品分開操作，以免加入模板時(shí)交叉污染。

　　重要提示：該房間內(nèi)的所有物品不得帶入試劑準(zhǔn)備區(qū)。

　　4、擴(kuò)增和產(chǎn)物檢測(cè)區(qū)域

　　此區(qū)域用于 PCR 擴(kuò)增和 PCR 分析，PER 儀表放置在該區(qū)域。 房間保持負(fù)壓，避免核酸外溢，該區(qū)域的人員必須始終穿著工作服

　　和手套，并在離開房間前脫下，以避免擴(kuò)增子污染其他位置，用于放大和產(chǎn)品測(cè)試的所有設(shè)備都應(yīng)指定給這個(gè)房間。