分光光度計(jì)，又稱(chēng)光譜儀，是一種將復(fù)雜光分解成光譜線的科學(xué)儀器。其測(cè)量范圍通常在為380~780nm內(nèi)區(qū)域。不同的光源其發(fā)射光譜也不同，因此可選用異光源為發(fā)射點(diǎn)。鎢燈發(fā)射光譜：鎢燈光源發(fā)射的波長(zhǎng)為380~780nm的光譜光經(jīng)棱鏡折射后，可得到由紅、橙、黃、綠、藍(lán)、靛、紫組成的連續(xù)色譜；色譜可作為可見(jiàn)分光光度計(jì)的光源。

分光光度法是對(duì)特定波長(zhǎng)或特定波長(zhǎng)范圍內(nèi)的光吸收進(jìn)行定性或定量分析。根據(jù)波數(shù)，常用范圍為：200~380nm的紫外線區(qū)域。使用的儀器有紫外分光光度計(jì)、可見(jiàn)分光光度計(jì)（或色度計(jì)）、紅外分光光度計(jì)或原子吸收分光光度計(jì)。為確保測(cè)量的精度和準(zhǔn)確度，所有儀器應(yīng)按照國(guó)家計(jì)量檢定規(guī)程或本附錄進(jìn)行定期校準(zhǔn)。

儀器組成：

分光光度計(jì)已成為現(xiàn)代分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)儀器。它通常用于定量核酸、蛋白質(zhì)和細(xì)菌生長(zhǎng)濃度。

儀器主要由光源、單色儀、樣品室、檢測(cè)器、信號(hào)處理器和顯示存儲(chǔ)系統(tǒng)組成。

物質(zhì)的吸收光譜：

如果將物質(zhì)溶液置于光源和棱鏡之間，屏幕上顯示的光譜不再是光源的光譜，并出現(xiàn)幾條暗線，即光源發(fā)射光譜中某些波長(zhǎng)的光由于溶液吸收而消失。這種被溶液吸收的光譜稱(chēng)為溶液的吸收光譜。

當(dāng)光通過(guò)物質(zhì)溶液時(shí)，透射光的強(qiáng)度下降，因?yàn)橐恍┕庠谌芤罕韺臃瓷浠蚍稚?，一些光被?gòu)成溶液的物質(zhì)吸收，并且只有一些光可以通過(guò)溶液。

分光光度計(jì)作為一種精密儀器，由于工作環(huán)境、操作方法等多種原因，必然會(huì)改變其技術(shù)狀態(tài)，影響產(chǎn)品性能，甚至引發(fā)設(shè)備故障和事故。因此，分析員必須了解分光光度計(jì)的基本原理和使用方法書(shū)，及時(shí)發(fā)現(xiàn)和消除這些隱患，并及時(shí)修復(fù)故障，以保證儀器設(shè)備的正常運(yùn)行。

1）如果測(cè)試波長(zhǎng)變化很大，請(qǐng)等待片刻，在燈熱平衡后重新校準(zhǔn)“0”和“100％”點(diǎn)。然后測(cè)量。

2）指針式儀表未通電時(shí)，儀表指針必須在零刻度上。如果情況并非如此，則需要進(jìn)行機(jī)械調(diào)零。

3）反應(yīng)杯使用完畢后，請(qǐng)立即用蒸餾水沖洗，并用干凈柔軟的紗布擦去水跡，以免損壞表層光潔度，影響反應(yīng)杯的透光率。

4）操作人員不得輕易移動(dòng)燈泡和反光燈，以免影響光效。