文章摘要: PCR實(shí)驗(yàn)室也叫基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室。PCR是聚合酶鏈反應(yīng)的簡稱。它是一種分子生物學(xué)技術(shù),用于擴(kuò)增特定的DNA,可視為特殊的DNA體外復(fù)制。用于基因檢測,具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、快速、簡便等特色。它可以將傳統(tǒng)方法難以檢測到的較少數(shù)DNA擴(kuò)增一百萬倍以上,從而大
PCR實(shí)驗(yàn)室也叫基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室。PCR是聚合酶鏈反應(yīng)的簡稱。它是一種分子生物學(xué)技術(shù),用于擴(kuò)增特定的DNA,可視為特殊的DNA體外復(fù)制。用于基因檢測,具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、快速、簡便等特色。它可以將傳統(tǒng)方法難以檢測到的較少數(shù)DNA擴(kuò)增一百萬倍以上,從而大大提高疾病的診斷水平。下面來了解一下PCR實(shí)驗(yàn)室的布局。
1、PCR實(shí)驗(yàn)室的聚合酶鏈反應(yīng)布局。
聚合酶鏈反應(yīng)擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室原則上分為三個獨(dú)立的工作區(qū):試劑儲存與制備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增與擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。為了避免交叉污染,進(jìn)入每個工作區(qū)嚴(yán)格遵循一個單一的方向,即只能從試劑儲存和制備區(qū)到標(biāo)本制備區(qū),再到擴(kuò)增和擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。試劑和樣品在實(shí)驗(yàn)區(qū)之間的轉(zhuǎn)移應(yīng)通過轉(zhuǎn)移窗口進(jìn)行。
2、PCR實(shí)驗(yàn)室空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)的設(shè)計(jì)及壓力控制。
聚合酶鏈反應(yīng)實(shí)驗(yàn)室對凈化水平?jīng)]有嚴(yán)格要求,但為了避免實(shí)驗(yàn)區(qū)之間交叉污染的可能性,建議采用全輸送、全排放的氣流組織形式。同時,要嚴(yán)格控制送風(fēng)和排風(fēng)的比例,以保證各個實(shí)驗(yàn)區(qū)的壓力要求。
(1)試劑儲存和制備區(qū)。
PCR實(shí)驗(yàn)室的主要操作是貯存試劑的制備、試劑的分裝和主反應(yīng)混合物的制備。用于樣品制備的試劑和材料應(yīng)直接運(yùn)輸?shù)皆搮^(qū)域,不得通過其他區(qū)域。試劑原料存放在該區(qū)域,所需存放的試劑在該區(qū)域準(zhǔn)備。為了控制氣壓,這個區(qū)域要對外界保持輕微的正壓。
(2)標(biāo)本制備區(qū)。
PCR實(shí)驗(yàn)室領(lǐng)域的主要操作是樣品保存、核酸(RNA和DNA)的提取和儲存、擴(kuò)增反應(yīng)管的添加和DNA合成的測定。要求該區(qū)域的壓力梯度相對于鄰近區(qū)域?yàn)檎员苊鈿馊苣z污染從鄰近區(qū)域進(jìn)入該區(qū)域。此外,采樣操作過程當(dāng)中可能會出現(xiàn)氣溶膠污染,因此應(yīng)避免在該區(qū)域進(jìn)行不必要的行走。
(3)PCR實(shí)驗(yàn)室的擴(kuò)增和擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。
該領(lǐng)域的主要操作是DNA擴(kuò)增和擴(kuò)增片段的測定。此外,將制備好的DNA模板加入(從樣品制備區(qū))和將主反應(yīng)混合物制備到反應(yīng)混合物中(從試劑儲存和制備區(qū))也可以在該區(qū)域進(jìn)行。PCR實(shí)驗(yàn)室區(qū)域的壓力梯度需要相對于鄰近區(qū)域的負(fù)壓,以避免氣溶膠從該區(qū)域泄漏。
PCR實(shí)驗(yàn)室的布局及通風(fēng)系統(tǒng)設(shè)計(jì)探討
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