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PCR實(shí)驗(yàn)室的建立步驟

發(fā)布時(shí)間:2024-03-04 07:56:13 來(lái)源:互聯(lián)網(wǎng) 分類(lèi):電氣知識(shí)

文章摘要: PCR實(shí)驗(yàn)室又稱(chēng)基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室。PCR是聚合酶鏈反應(yīng)的簡(jiǎn)稱(chēng)。它是一種用于擴(kuò)增特定DNA的分子生物學(xué)技術(shù),可視為體外特殊的DNA復(fù)制。通過(guò)DNA基因追蹤系統(tǒng),可以以納米級(jí)的精度快速掌握患者體內(nèi)的雜質(zhì)含量。下面我們來(lái)簡(jiǎn)單了解一下PCR實(shí)驗(yàn)室的建立。1、建立樣品制

PCR實(shí)驗(yàn)室又稱(chēng)基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室。PCR是聚合酶鏈反應(yīng)的簡(jiǎn)稱(chēng)。它是一種用于擴(kuò)增特定DNA的分子生物學(xué)技術(shù),可視為體外特殊的DNA復(fù)制。通過(guò)DNA基因追蹤系統(tǒng),可以以納米級(jí)的精度快速掌握患者體內(nèi)的雜質(zhì)含量。下面我們來(lái)簡(jiǎn)單了解一下PCR實(shí)驗(yàn)室的建立。

1、建立樣品制備區(qū)

該區(qū)域?qū)S糜跇悠分苽?。制備和操作核酸提取試劑時(shí)的注意事項(xiàng):

(1)PCR產(chǎn)物和有待擴(kuò)增序列的DNA克隆不可在本室操作。

(2)將組織培養(yǎng)物、組織標(biāo)本和血清樣品帶入PCR實(shí)驗(yàn)室的制樣室進(jìn)行處理,根據(jù)應(yīng)用需要提取DNA或RNA。

PCR實(shí)驗(yàn)室

(3)用于樣品處理的工具不可作為普通的分子克隆工具使用,也不可用于操作目標(biāo)序列。

(4)處理DNA樣品時(shí),應(yīng)有專(zhuān)用保護(hù)裝置或正壓活塞移液器,避免吸樣時(shí)留下氣溶膠。

(5)大體積樣品應(yīng)使用單包裝一次性移液器吸取。

(6)開(kāi)管前先離心一小段時(shí)間,以減少氣溶膠的產(chǎn)生。不要強(qiáng)行倒塌,以免產(chǎn)生氣溶膠。

(7)在 PCR 實(shí)驗(yàn)室中始終穿著實(shí)驗(yàn)室工作服和手套。應(yīng)經(jīng)常更換手套,尤其是在提取過(guò)程的每個(gè)步驟之間。PCR實(shí)驗(yàn)室外套應(yīng)專(zhuān)門(mén)用于樣品制備室并經(jīng)常清理。

2、樣品制備和RNA-PCR的額外步驟是RNA-PCR需要額外的樣品操作,這增加了樣品之間污染的機(jī)會(huì)。為了避免這個(gè)問(wèn)題,可以在PCR實(shí)驗(yàn)室的樣品制備區(qū)進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄步驟。

3、建立PCR實(shí)驗(yàn)室前沿區(qū)

該區(qū)域?qū)S糜诟鞣N反應(yīng)的制備。PCR實(shí)驗(yàn)室的前部區(qū)域需要保持清理,不受克隆和樣品制備造成的污染。PCR實(shí)驗(yàn)室前區(qū)需要試劑和準(zhǔn)備,尤其是PCR前區(qū)專(zhuān)用的正壓活塞移液器。


PCR實(shí)驗(yàn)室的建立步驟

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