中質(zhì)檢測(cè)化妝品HRIPT/RIPT測(cè)試,提供中質(zhì)檢測(cè)HRIPT/RIPT測(cè)試時(shí)效

亞馬遜要求化妝、美容類產(chǎn)品需做此測(cè)試

為了確保在使用產(chǎn)品或原料后不會(huì)產(chǎn)生潛在的刺激或過敏。亞馬遜要求化妝品，美容產(chǎn)品，指甲膠等需要做HRIPT /RIPT 多次重復(fù)封閉性皮膚斑貼測(cè)試報(bào)告。

沒有相關(guān)測(cè)試報(bào)告的店鋪可能面臨產(chǎn)品被下架、扣留貨款等處罰！

什么是HRIPT / RIPT？

RIPT：重復(fù)全封閉型皮膚斑貼試驗(yàn)(Repeated Insult Patch Test, RIPT)，是目前最為嚴(yán)格的研究使用產(chǎn)品或原料后不會(huì)產(chǎn)生潛在的刺激或過敏，使用九組誘發(fā)斑貼，一段時(shí)間的休息之后緊接著是一組激發(fā)測(cè)試。

HRIPT：人體重復(fù)性損傷性斑貼試驗(yàn)(Human Repeated Insult Patch Test, HRIPT)

亞馬遜要求的 審核郵件
產(chǎn)品安全要求您采取以下步驟來(lái)回應(yīng)上述問題：
1.最重要：提交該物品的所有相關(guān)安全測(cè)試數(shù)據(jù)和證明。我們要求您包括專門針對(duì)所涉事件的測(cè)試。如有任何疑問，請(qǐng)參閱“產(chǎn)品合規(guī)性指南”隨附的文字文檔。請(qǐng)注意：MSDS不足以進(jìn)行安全測(cè)試。
2.請(qǐng)?zhí)峁┊a(chǎn)品經(jīng)過HRIPT / RIPT測(cè)試或其他皮膚刺激性測(cè)試以及COA的證據(jù)。
3.完成隨附的產(chǎn)品安全調(diào)查表。該問卷旨在解決客戶提出的安全問題。
4.提供產(chǎn)品圖像（正面，背面，配件和包裝）。圖片應(yīng)包括：產(chǎn)品或包裝上的型號(hào)/序列號(hào)，安全/合規(guī)標(biāo)記和徽標(biāo)以及安全標(biāo)簽和警告。另請(qǐng)附上說(shuō)明手冊(cè)的副本。

目前國(guó)內(nèi)很少有報(bào)道采用HRIPT進(jìn)行化妝品安全性評(píng)估。本文介紹了筆者科室近期進(jìn)行的一項(xiàng)針對(duì)常見刺激物及11種受試產(chǎn)品的HRIPT試驗(yàn)，對(duì)如何進(jìn)行HRIPT試驗(yàn)和結(jié)果判讀進(jìn)行闡述。
1 材料和方法

1.1實(shí)驗(yàn)對(duì)象：53名健康自愿受試者，其中男性6名，女性47名。受試者年齡為23～53歲（平均為34.7歲）。排除標(biāo)準(zhǔn)：①處于懷孕期、哺乳期或分娩半年內(nèi)；②患有可能干擾試驗(yàn)結(jié)果或增加受試者研究參加風(fēng)險(xiǎn)的急性或慢性疾病；③正在口服或外用可能干擾試驗(yàn)結(jié)果的藥物（如糖皮質(zhì)激素、非甾體類消炎藥、抗組胺類藥物和免疫抑制劑等）；④患有慢性過敏性皮膚病或近12個(gè)月內(nèi)被診斷為皮膚腫瘤并接受治療者；⑤在斑貼部位有日曬傷、皮膚顏色不均勻、文身、痤瘡、濕疹、牛皮癬、瘢痕及其他可能會(huì)影響觀察的皮膚病受試者；⑥試驗(yàn)經(jīng)過北京大學(xué)第一醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，所有受試者知情同意并簽署知情同意書。

1.2試驗(yàn)材料

1.2.2斑試器：封閉式斑試器：為貼附于封閉式膠帶上的8mm鋁制小碟（北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部醫(yī)學(xué)儀器公司）；半封閉斑試器：為直徑23mm的圓形防過敏膠帶（Curad Sensitive Skin ， Beiersdorf Inc.， Wilton CT）。

1.3試驗(yàn)流程[3]： 整個(gè)試驗(yàn)過程分為誘導(dǎo)期（3周），休息期（2周）和激發(fā)期（1周）三部分，持續(xù)時(shí)間為6周。試驗(yàn)過程如圖1所示。

1.3.1誘導(dǎo)期：將加有受試物的斑試器用無(wú)刺激膠帶貼敷于受試者的脊柱右側(cè)，用手掌輕壓以使之均勻地貼敷于皮膚上，并用標(biāo)記筆標(biāo)記斑貼部位，保證誘導(dǎo)階段9次每個(gè)產(chǎn)品都是貼在相同的部位（每周一、三、五進(jìn)行），如圖2所示。持續(xù)24h后，囑受試者將斑試器取下，避免搓洗局部。再間隔24h后（即下次斑貼之前，周五斑貼的為間隔48h）觀察反應(yīng)。以上步驟共重復(fù)9次，持續(xù)時(shí)間為3周。

1.3.2 休息期：在誘導(dǎo)期結(jié)束后休息10～14天，期間無(wú)任何處理。

2 結(jié)果

2.1結(jié)果判讀：HRIPT的結(jié)果是根據(jù)受試者在誘導(dǎo)期和激發(fā)期的皮膚反應(yīng)綜合判定的。如受試者在某個(gè)樣品點(diǎn)上誘導(dǎo)期早期即發(fā)生紅斑、水腫、丘疹等反應(yīng)，并在激發(fā)期再次出現(xiàn)同樣等級(jí)的反應(yīng)，表明該受試者在試驗(yàn)前已被該樣品致敏，記為前致敏狀態(tài)（Pre-sensitization）。如果在誘導(dǎo)期出現(xiàn)輕度反應(yīng)（1～2分），而激發(fā)期未再現(xiàn)，為該樣品重復(fù)刺激造成的刺激反應(yīng)（Irritation）；如果受試者在激發(fā)期的反應(yīng)較誘導(dǎo)期明顯增強(qiáng)，表示該樣品在試驗(yàn)期間誘導(dǎo)出這位受試者的過敏反應(yīng)，提示這種產(chǎn)品具有潛在致敏性，記為誘導(dǎo)過敏（Induction of Sensitization） [5]。

Henderson 和Riley 對(duì)HRIPT的結(jié)果進(jìn)行過統(tǒng)計(jì)學(xué)推算，假設(shè)在樣本量為100的人群中進(jìn)行HRIPT檢測(cè)，如果結(jié)果為陰性，那么在同樣情況下使用這些產(chǎn)品時(shí)，在人群中產(chǎn)生過敏反應(yīng)的幾率*大不會(huì)超過2.9%[2]。需要注意的是，因?yàn)镠RIPT是在增加濃度和封閉的情況下測(cè)試，實(shí)際使用時(shí)過敏率更低，根據(jù)Hall等[6]的估計(jì)，化妝品誘導(dǎo)出皮膚過敏的概率約為0.09%。因此，HRIPT的陰性結(jié)果可以作為確證實(shí)驗(yàn)來(lái)證實(shí)化妝品的安全性。

3 討論

人重復(fù)性損傷性斑貼試驗(yàn)（Human Repeated Insult Patch Test， HRIPT）自1944年被Schwartz和Peck提出以后，經(jīng)過不斷的改良，目前已經(jīng)被認(rèn)為是評(píng)價(jià)新材料或消費(fèi)品對(duì)人體致敏性和刺激性的*可信方法。HRIPT在歐美的使用率是*高的，經(jīng)濟(jì)與合作發(fā)展組織（OECD）和EU試驗(yàn)指南中這兩種試驗(yàn)也是優(yōu)選的方法，并可以在其他方法獲得數(shù)據(jù)不足的時(shí)候作為確證試驗(yàn)[2]。HRIPT具有封閉性，可以模擬并放大人體實(shí)際使用過程，現(xiàn)已證實(shí)封閉式試驗(yàn)優(yōu)于皮內(nèi)注射和開放式局部應(yīng)用的方法，具有足夠的敏感性，能檢測(cè)出絕大部分的致敏物[7-8]。

HRIPT在誘導(dǎo)期，每次斑貼持續(xù)24h，然后間隔24h或48h讀結(jié)果，并進(jìn)行下一次斑貼，可以使前一次斑貼造成的皮膚反應(yīng)充分顯現(xiàn)。誘導(dǎo)期結(jié)束后2周的休息期則使得各種免疫反應(yīng)可以充分進(jìn)行，并且此時(shí)誘導(dǎo)期的過敏反應(yīng)通常都已消失，不會(huì)對(duì)激發(fā)期產(chǎn)生干擾。所用檢測(cè)物的濃度設(shè)定通常建議采用不引起刺激的*高濃度，這個(gè)濃度是從之前人體刺激性試驗(yàn)、過敏原測(cè)試和人體重復(fù)應(yīng)用試驗(yàn)中的數(shù)據(jù)中獲得，有時(shí)還需要結(jié)合試驗(yàn)設(shè)計(jì)考慮，如對(duì)實(shí)際應(yīng)用中濃度放大數(shù)倍或者參照誤用后濃度進(jìn)行檢測(cè)。通過采取劑量依賴性研究甚至可以了解通過減少劑量是否能達(dá)到安全的使用量，即反應(yīng)誘發(fā)閾值（response elicitation threshold）[9]。這些特點(diǎn)都使得HRIPT具有更高的敏感性。在本研究中，11種產(chǎn)品在激發(fā)期都沒有出現(xiàn)陽(yáng)性反應(yīng)，但在誘導(dǎo)期有1～9人對(duì)5種樣品1、4、5、7、12、13和14中出現(xiàn)輕度紅斑反應(yīng)，提示在實(shí)際使用過程中，重復(fù)外用這幾種化妝品可能具有一定的刺激性。但這個(gè)結(jié)果只有通過HRIPT才能夠發(fā)現(xiàn)，因?yàn)閭鹘y(tǒng)的斑貼試驗(yàn)是單次試驗(yàn)結(jié)果判讀，就會(huì)得到類似誘導(dǎo)期的陰性結(jié)果。再次證明HRIPT的敏感性和在化妝品安全性檢測(cè)中的重要意義。

斑貼試驗(yàn)的結(jié)果受到諸多因素的影響，如稀釋受試樣品的基質(zhì)、樣品濃度、所用樣品的量、封閉方式等都可能影響，產(chǎn)生假陽(yáng)性或假陰性的結(jié)果[10-11]。通常情況下，對(duì)于乳液、爽膚水等可在皮膚上長(zhǎng)期駐留的產(chǎn)品可以選擇用未經(jīng)稀釋的原液進(jìn)行斑貼。而對(duì)于潔面乳這種洗脫類產(chǎn)品，由于在實(shí)際使用中會(huì)被大量的水沖洗掉，選擇用蒸餾水進(jìn)行稀釋，用1%的稀釋液進(jìn)行斑貼。即使這一濃度也大于實(shí)際使用中人體對(duì)這種化妝品的暴露濃度[12]。此外，封閉式斑試器也起到對(duì)受試樣品暴露的放大作用。而對(duì)于卸妝乳，其油溶性成分含量較高，通過以油溶油的原理去除彩妝，本身性質(zhì)比較溫和，某些按摩油本身也具有卸妝的作用，可以在面部長(zhǎng)期駐留。因此需要根據(jù)產(chǎn)品本身的性質(zhì)判斷濃度和斑貼方式。本研究中有3種卸妝乳，考慮到放大效應(yīng)，對(duì)3、5號(hào)選擇了封閉式斑貼，11號(hào)因?yàn)楹休^多量表面活性劑，與12～14號(hào)潔面乳一樣選擇了半封閉斑試器進(jìn)行試驗(yàn)。結(jié)果只有5號(hào)有輕度的刺激反應(yīng)，無(wú)過敏反應(yīng)出現(xiàn)，說(shuō)明在實(shí)際應(yīng)用中是很安全的。

在進(jìn)行多樣品斑貼試驗(yàn)時(shí)還需要注意激動(dòng)皮膚綜合征（excited skin syndrome）， 是由于皮膚對(duì)于某個(gè)樣品包括對(duì)于斑貼所用的膠帶等產(chǎn)生的強(qiáng)烈反應(yīng)，可能會(huì)誘導(dǎo)出高激惹狀態(tài)（俗稱“激惹的后背”），從而使得其他樣品也出現(xiàn)輕度的陽(yáng)性反應(yīng)[13]。在本研究中，我們觀察到一些受試者對(duì)試驗(yàn)用的膠帶或陽(yáng)性對(duì)照產(chǎn)生比較強(qiáng)烈的反應(yīng)，同時(shí)多個(gè)其他樣品點(diǎn)也表現(xiàn)為輕度紅斑反應(yīng)，可能也受到了激動(dòng)皮膚綜合征的影響，對(duì)于膠帶或陽(yáng)性對(duì)照的強(qiáng)陽(yáng)性反應(yīng)也可能增加了樣品刺激反應(yīng)率。

總之，HRIPT 通過采用延長(zhǎng)暴露時(shí)間，采用較高使用濃度和封閉斑貼的方法，達(dá)到一種比實(shí)際使用時(shí)的放大效果，并可以檢測(cè)出極微弱的刺激反應(yīng)，提示在實(shí)際使用時(shí)可能出現(xiàn)的風(fēng)險(xiǎn)。HRIPT的陰性結(jié)果可以證明人體不會(huì)對(duì)特定產(chǎn)品或配方產(chǎn)生不良反應(yīng)。盡管如此，需要注意的是：出于倫理方面的考慮，HRIPT試驗(yàn)并不用于預(yù)測(cè)或者篩選鑒定潛在的致敏原，而主要作為確證試驗(yàn)，在放大應(yīng)用的條件下來(lái)檢測(cè)配方中的過敏原，保證產(chǎn)品在面對(duì)消費(fèi)者應(yīng)用時(shí)的安全性[1-2]
化妝品護(hù)膚品HRIPT、RIPT多次重復(fù)封閉性測(cè)試

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深圳市中質(zhì)技術(shù)服務(wù)有限公司（Shenzhen ZTS Testing Service Co.,Ltd.）英文簡(jiǎn)稱“ZTS”)總部位于深圳 光明新區(qū)，是一家集檢測(cè)、認(rèn)證、測(cè)試、報(bào)告、清關(guān)、驗(yàn)貨、注冊(cè)、驗(yàn)廠等一站式服務(wù)機(jī)構(gòu)。遵循“科學(xué) 公正 準(zhǔn)確 高效”的質(zhì)量方針，遵循國(guó)際準(zhǔn)則和慣例以及國(guó)家的法律法規(guī)，在嚴(yán)格的程序下開展工作，對(duì)所有委托方均持科學(xué)、公正的態(tài)度，堅(jiān)持保密的原則，向社會(huì)各界提供優(yōu)質(zhì)高效的服務(wù)。
化妝品.護(hù)膚品.HRIPT / RIPT測(cè)試多次重復(fù)封閉性皮膚斑貼測(cè)試辦理
化妝品在使用時(shí)與人體表面直接接觸，如果產(chǎn)品存在問題，可能會(huì)引起包括皮膚不良反應(yīng)。斑貼試驗(yàn)作為常用的化妝品安全性測(cè)試，可以檢測(cè)這種潛在可能性，以確?；瘖y品使用安全性；

常見的皮膚斑貼試驗(yàn)類型，包括封閉型斑貼試驗(yàn)、重復(fù)性開放型試驗(yàn)、重復(fù)損傷性斑貼試驗(yàn)；

一般情況下，化妝品普遍采用皮膚封閉型斑貼試驗(yàn)；

特殊情況下，例如祛斑類化妝品和粉狀（如粉餅、粉底）防曬類化妝品，在進(jìn)行人體皮膚斑貼試驗(yàn)出現(xiàn)刺激性結(jié)果或結(jié)果難以判斷時(shí)，應(yīng)當(dāng)增加皮膚重復(fù)性開放型涂抹試驗(yàn)。皮膚重復(fù)性開放型試驗(yàn)也適用于淋洗類產(chǎn)品、染發(fā)劑、脫毛類等產(chǎn)品；

中質(zhì)檢測(cè)機(jī)構(gòu)為了更好的服務(wù)全球客戶，已在長(zhǎng)沙、寧波等地設(shè)立了多個(gè)分支機(jī)構(gòu)，并在香港、新加坡等地設(shè)立了海外辦事機(jī)構(gòu)，致力于以完善的服務(wù)網(wǎng)絡(luò)為海內(nèi)外客戶提供便捷的服務(wù)。作為綜合性、專業(yè)性、國(guó)際性的檢測(cè)驗(yàn)證機(jī)構(gòu)，TDT憑借先進(jìn)的技術(shù)和卓越的服務(wù)理念，為廣大企業(yè)解決了眾多品質(zhì)難題，為各行業(yè)的生產(chǎn)企業(yè)、貿(mào)易商、買家提供全面的、專業(yè)的質(zhì)量技術(shù)服務(wù)，贏得了客戶和社會(huì)的信賴。